FISH成像

Photometrics的高性能CCD相机常用于荧光原位杂交(FISH)应用,例如全染色体涂抹、位点特异性分析、基因定位以及比较基因组杂交(CGH)等。

起初使用CCD相机的原因是它能够比人眼看的更清晰。小cDNA克隆、CGH实验以及组合标记探针可视化都要求较低的光灵敏度。具体来说,相机可光学耦合到显微镜,以便像素到像素分辨率与显微镜光学装置相匹配。这样一来,基因定位就受限于理论分辨率极限,而非成像设备。

最后,光强转换的具体线性方式允许在CGH应用中精确的分布测定、组合标记期间准确的探针区分以及在大背景上(1千碱基以下探针所特有)检测微弱信号。

FISH
图片由Photometrics提供。

上图的间期核(蓝色)用荧光标记对X和Y(红色与绿色)染色体进行了标示。该彩色合成图像根据三幅在对应于DAPI(蓝)、FITC(绿)和Texas Red(红)的发射波长下所采集到的图像而创建。

FISH App Note

Download the PDF: Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) Imaging

随着分子生物学领域不断涌现许多功能更为强大的新型工具,采用核酸探针来探测同类DNA或RNA序列的存在性已变得相当普遍。荧光原位杂交(FISH)采用在固定化细胞内杂交或组织制备后的荧光脱氧核苷酸来探测DNA探针的位置。从FISH获得的信息非常丰富,从全染色体鉴定到基因拷贝数测定,再到细胞内具体mRNA核素的定位。